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 冠状病毒主蛋白酶催化机理初探 | 风铃 | 2007-11-07 |
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| 冠状病毒是一种常见的RNA病毒，30%的流感是由229E株冠状病毒引起的。
SARS病毒是冠状病毒的一个新的分株。3CL蛋白水解酶是SARS病毒复制中的关键蛋白，且被认为是进行抑制剂筛选的最理想的靶标。
SARS-Cov 3CL蛋白水解酶与猪源性胃肠道冠状病毒（TGEV）的主蛋白酶(Mpro，也叫3CLpro)具有相似的结构，尤其在活性位点上非常相似。
TGEV Mpro催化结构是Cys144-His41,是一个催化二体结构，这不同于普通的半胱氨酸和丝氨酸蛋白酶家族的催化结构---催化三体 Cys(Ser)-His-Asp 。
冠状病毒复制过程：
冠状病毒粒子进入宿主细 阅读全部内容＞＞ |
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| 18种中成药污染细菌的回收率试验 | 匿名 | 2007-10-22 |
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| 摘要:目的:对部分中成药品种的微生物限度检查法进行方法验证 ,为规范中成药微生物限度检查方法提供科学依据。方法:
对 18 种中成药人为细菌污染后再进行细菌的回收率测定 ,从而确认其抑菌活性。结果:18 种中成药中只有 7 种细菌回收率
高于 70 % ,符合验证试验要求 ,其余 11 种中成药都不同程度地存在抑菌现象 ,回收率均低于 70 % ,不符合验证试验要求。结
论:复方鲜竹沥液等 7 种中成药可按常规方法 ,其余应用培养基稀释或离心集菌过滤等方法进行微生物限度的细菌学检查。
关键词:中成药;微生物限度检查法;验证试验
中图分类号 :R 28515 文献标识码 :A
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| 大肠菌群测定的操作细则 | 无忧草 | 2007-10-08 |
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| 大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。
食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
1 设备和材料
1.1 温箱：36±1℃。
1.2 冰箱:0～4℃。
1.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃。
1.4 天平。
1.5 显微镜。
1.6 均质器或乳钵。
1.7 平皿:直径为90mm。
1.8 试管。
1.9 吸管。
1.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。
1.11 玻 阅读全部内容＞＞ |
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| EphA2在大肠腺癌中的表达 | 周周 | 2007-09-29 |
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| EphA2基因的介绍
EphA2是Lindberg于1990年用简并引物从人角化细胞cDNA文库中筛选得到的一个Eph（Erythropoitin-produceing hepato-cellular,Eph) 亚家族成员 。
人EphA2基因定位于1p36.1,有17个外显子。
Eph受体家族是已知最大的酪氨酸蛋白激酶受体(receptor tyrosine kinase, RTK)家族最大的家庭。
Eph家族受体激酶和他们EFN配体介导的细胞信号传
导参与神经系统的基本发生过程、神经系统的信号传
递，在细胞的分化、发育、增殖，组织和器官的形成、血管生成、细胞与细胞之间 阅读全部内容＞＞ |
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| FOB在大肠癌筛查中的评价 | 周周 | 2007-09-29 |
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| 因素 患者组 对照组 p 值
+(%) -(%) +(%) -(%)
粘液血便 178(62.7) 106(37.3) 20(7.0) 264(93.0) <0.001
慢性腹泻 85(29.9) 199(70.1) 15(5.3) 270(94.7) <0.001
慢性便秘 50(17.5) 235(82.5) 17(5.9) 269(94.1) <0.001
精神刺激史 47(17.5) 238(82.5) 17(8.4) 269(91.6) 0.003
红烧鱼 273(96.5) 10(3.5) 261(92.2) 22 阅读全部内容＞＞ |
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| 首因效应向近因效应转换的实验研究 | 庞洲 | 2007-09-26 |
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| 1 前言
近年，系列位置效应研究又成为记忆研究的热门话题。这与近因向首因效应转换的发现有关。近因向首因效应的转换是指随学习和测验时间间隔的增加对项目表中前面项目的记忆改进，而对后面项目的记忆变差。最早由Wright等人（1985年）提出。涉及的刺激材料有图形和词句；此现象不仅成人而且猴子、婴儿也有报道；此外，在运用探测项目是否识别的范式和运用4择1的系列位置确认范式中都观察到这种效应（Cornell等，1983年、Neath,1993、Neath和Knoedler,1994、Wright,1998、Korsnes等，1996等）。因此，这种随延缓的增加，近因效应与首因效应相对优势的变化被看 阅读全部内容＞＞ |
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| 254例安置起搏器术后健康需求调查及对策 | 商海 | 2007-09-19 |
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| 随着我国心律失常介入治疗的迅速发展，心脏起搏器的临床应用日益广泛，而病人一旦安置了心脏起搏器，起搏器就成了保障病人生命安全的重要武器。他将终年的陪伴病人，使病人能过正常的生活。而在安置起搏器以后的漫长岁月里，如何保证病人术后安全生活，了解和满足他们健康需求，已成为人工心脏起搏器治疗非常重要的课题。如世界上第一个植入心脏起搏器的阿尔内拉松，如今83岁高龄，还能到各地旅行，起搏器陪伴他已度过了40个春秋。说明良好的健康指导可使病人如常人一样生活。因此我们对254例安置永久性心脏起搏器病人进行健康需求的调查。针对调查结果，采取了相应的健康教育对策。通过九化式的健康教育、“起搏之友”联谊会、学习班式的强 阅读全部内容＞＞ |
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| 植物病毒胞间运动分子生物学研究进展 | 乐 | 2007-07-31 |
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| 许多植物病毒在最初侵染植物之后，从最初侵染的细胞移动到相邻的健康细胞，到达维管束系统 之后 ，能随着光同化作用被动地进行系统的长距离运输，引起系统侵染。动物病毒通过受体介导的吞 噬作用 和细胞融合的运动机制不适合于植物病毒，因为每个植物细胞都有细胞壁包被着“植物病毒细胞到细胞的距离运动是一个主动过程，其运动由病毒所编码的非结构蛋白—— 运动蛋白所介导。运动蛋白与病毒核酸和胞间连丝相互作用，改变胞间连丝允许通过的最大孔径 (size exclusion limit，SEL)，增 加其渗透性，使得毒核酸以病毒粒子或核糖核蛋白(RNP)的形式通过胞间连丝到达相邻的健康的细胞。运动蛋白介 导植物病毒细胞 阅读全部内容＞＞ |
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| 植物病毒长距离转运的分子机理 | 乐 | 2007-07-31 |
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| 植物病毒侵入寄主细胞后．其局部侵染和系统侵染的形成涉及病毒在植物体内二种不同的转运模式：经叶内细胞胞 闻连 丝来实现 的胞闻转运 (cel—to—cell movement)和经过植物维管系统的韧皮部筛管来实现的长距离转运 (1ong—dis—tance transport)_】_。近十 年来 对胞 闻转 运 的大量 研究，尤 其 是对 TMV在烟草 叶肉细胞 闻转运机理 的出色研究 ，使 人们逐步 明晰了病毒胞间转运的一些基 本步骤及转运机理 。建 立起了植物病 毒胞 间转运机理研 究 的基 本模式1 0】与此同时。因病毒的长距离转运 是其 实现系统侵 染的关 键过 程．人们对病 毒长距离转运 阅读全部内容＞＞ |
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| 全国高等中医院《伤寒学》教学大纲 | 新风书童 | 2007-07-20 |
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| 前言
《伤寒学》是以中医经典著作《伤寒论》以及历代医家研究与发展《伤寒论》的学术成就委研究对象，以六经辨证论治体系的内涵、外延与理法方药综合运用的基本规律为研究内容，以提高临床辨证论治水平与临床疗效为最终目的的一门学科。本学科既有基础学科的特点，又有临床学科属性，既是学习和研究临床学科的重要基础，又是基础学科和临床学科的桥梁，是中医专业的主干课程。
本门课程的教学目的和任务是：在内经、中医基础理论、中医诊断学、中药学、方剂学课程基础上，以六经辨证为核心，将理、法、方、药连贯起来，并紧密结合临床，通过课堂讲授、实验、见习等教学环节，使学生掌握六经辨证理论体系，相关汤证辨证论治的基本理论、知识、 阅读全部内容＞＞ |
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| 中国生物医药产业陷入"资金荒"(2007年文献) | Simin | 2007-07-19 |
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| 近年来我国生物医药产业发展迅速，但行业的高速发展却未能引发投资热潮，处于起步阶段的国内生物医药产业陷入了“资金荒”。
“生物技术是我国发展最快、潜力最大、与国外差距最小的领域之一。”在近日召开的”第一届中国生物产业大会上，北大未名集团董事长潘爱华表示。
据潘爱华介绍，目前我国的生物产业发展已初具规模，2004年我国广义产业实现工业总产值6000亿元，其中现代生物产业的产值为600多亿元；2005年，全国生物产业实现工业增加值约2000亿元，生物医药产业是其中的支柱。目前我国已有生物制药企业2000多家，30多个生物技术药物进入临床应用，170多个进入临床研究阶段，世界上最主要 阅读全部内容＞＞ |
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| 蛋白序列比较与蛋白进化教程 | 小草 | 2007-07-18 |
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| The concurrent development of molecular cloning techniques, DNA sequencing methods, rapid sequence
comparison algorithms, and computer workstations has revolutionized the role of biological sequenceusually one of the last steps in the characterization of a protein. Now the process is reversed, so th 阅读全部内容＞＞ |
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| PCR常见问题分析及解决方素 | 小草 | 2007-07-18 |
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| PCR技术
PCR技术简介及常见问题
提高PCR反应特异性的策略
RT-PCR技术
RT-PCR简介及常见问题策略
DNA模板
– 纯度 蛋白、多糖、酚类等抑制
– 完整性 模板降解会导致PCR扩增无
– 浓度 浓度适当
引物
– 特异性 长度适当、避免二级结构
– 完整性 避免反复冻融
– 浓度 过高导致非特异性增加,
过低则扩增产物太少 阅读全部内容＞＞ |
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| 富含多糖的白桦成熟叶片DNA的提取方法 | 小草 | 2007-07-18 |
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| 目前植物基因组 DNA的提取方法有很多 [1～5] ,不同的植
物材料 ,所适合的提取方法也不同。白桦由于其组织细胞中
含有大量的多糖、多酚及其它次生代谢产物 ,常规方法所提取
的 DNA质量较差。如果提取方法选择不当 ,会使 DNA埋在这
种粘稠胶状物中而难以溶解 [6] ,尤其是当必需以成熟叶片为材
料时 (如 southern分析不同时间外源基因的整合情况 ) ,采用常
规方法提取无法得到纯度较高的基因组 DNA。关于针对树种
及果实等富含次级代谢产物的植物材料的核酸提取方法已有
报道 [7～9] ,但是针对富含多糖的白桦成熟叶片基因组 DNA的
提取方法 ,目前未见 阅读全部内容＞＞ |
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| 工业生物技术学术研讨会 | 小草 | 2007-07-18 |
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| 20 世纪 80 年代起，生物技术开始从实验室研究走向产业，并经历了“三次浪潮”：1982
年，美国批准胰岛素和生长激素投放市场，是生物技术产业化第一次浪潮的标志(医药生物技
术，Red Biotechnology)；随后生物技术迅速发展到农业的各个领域，1996 年转基因大豆、
玉米、油菜相继上市，掀起了生物技术产业发展的第二次浪潮(农业生物技术，Green
Biotechnology)。现在正向工业领域拓展，开发工业生物技术。美国把这个新趋势称之为“生
物技术的第三次浪潮”，欧洲则称之为“白色生物技术(White Biotechnology)”。
工业生物技术是以微生物或酶为生物 阅读全部内容＞＞ |
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| 基因专业词汇 | 小草 | 2007-07-18 |
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| 腺苷脱氨酶缺乏症 adenosine deaminase deficiency (ADA)
腺病毒 adenovirus
Alagille 综合征 Alagille syndrome
等位基因 allele
氨基酸 amino acids
动物模型 animal model
抗体 antibody
凋亡 apoptosis
路-巴综合征 ataxia-telangiectasia
常染色体显性 autosomal dominant
常染色体 autosome
B
细菌人工染色体 bacterial artificial chromosome (BAC)
碱基对 base 阅读全部内容＞＞ |
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| 现代分子生物学实验技术教材 | 小草 | 2007-07-18 |
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| 把一个有用的目的 DNA 片段通过重组 DNA 技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫
载体(Vector)。细菌质粒是重组 DNA 技术中常用的载体。
质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从 1-200kb 不等,为双链、闭环的 DNA
分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，它具有
自主复制和转录能力,能在子代细胞中保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。质粒的复制
和转录要依赖于宿主细胞编码的某些酶和蛋白质，如离开宿主细胞则不能存活,而宿主即使没有
它们也可以正常存活。质粒的存在使宿主具有一些额外的特性,如对抗生 阅读全部内容＞＞ |
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| 单克隆抗体的抗体人源化研究进展 | 振兴 | 2007-07-16 |
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| 单克隆抗体的抗体人源化研究 进展
19世纪末,动物来源的抗血清就已经用于肺炎、白喉、麻疹等传染病的早期治疗,显示了一定效果,但毒副作用大,特别是异源蛋白易产生过敏反应。过去的抗体来源一般为鼠单抗，这一问题尤为明显。
将抗体人源化是解决这一问题的最好方法。最近二十多年来，伴随着基因工程手段的快速发展，对人源化抗体的研究，历经了人—鼠嵌合抗体、人源化单克隆抗体及人源性单克隆抗体三个发展阶段
★人鼠嵌合抗体是从鼠源单抗到全人抗体的过渡形式。在鼠单抗的基础上，用人抗体恒定区置换鼠抗体的相应部位，形成人鼠嵌合抗体。
★这类抗 阅读全部内容＞＞ |
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| 索拉非尼治疗黑色素瘤和肺癌的研究进展 | GIGI | 2007-07-16 |
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| 编者按 索拉非尼在肾癌治疗上取得的巨大成功使许多研究者尝试将其应用于其他肿瘤的治疗,迄今为止,已在超过20种肿瘤中进行了相关研究。索拉非尼治疗黑色素瘤的Ⅰ/Ⅱ期临床研究初步结果令人鼓舞。一项Ⅱ期临床研究中,35例转移性黑色素瘤患者接受了剂量递增的索拉非尼联合卡铂和紫杉醇治疗后,11例获得了部分缓解,有效率为31.4%。
索拉非尼治疗肺癌的研究也取得不错结果,2006年ASCO年会上,Gatzemeier报告一项索拉非尼应用于52例Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的Ⅱ期临床研究,结果显示索拉非尼治疗使30%的患者取得疾病稳定,28%的患者病灶缩小;所有患者的无进展生存期(PFS)为11.9 阅读全部内容＞＞ |
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| 常用肿瘤标志物及主要临床意义 | GIGI | 2007-07-16 |
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| 1.SCCA 鳞状细胞癌相关抗原 (≤1.5ng/ml)
对宫颈鳞癌、肺和头颈部鳞癌诊断和疗效监测，复发监测有重要意义。
2.NSE 神经元特异性烯醇化酶 (0-13ug/L)
在SCLC、神经母细胞瘤、APUD系统肿瘤均可增高。
3.TPA 组织多肽抗原(0-1ug/L)
为角蛋白8、18、19片段，可反映肿瘤增殖状态，用于膀胱癌、乳腺癌、肺癌、结直肠癌、宫颈癌、卵巢癌和肝胆肿瘤的辅助诊断。
4.TPS组织特异性多肽抗原(≤80u/L)
为角蛋白18片段M3抗原决定簇，是反映肿瘤细胞分裂和增殖活性的特异指标。与反映肿瘤容量的标志物CA153、CA125、CA199、 阅读全部内容＞＞ |
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| 生物化学代谢图 | 乐 | 2007-07-16 |
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| 7α-甲氧基头孢菌素的重要中间体合成路线简析 | 乐 | 2007-07-16 |
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| 甲氧基头孢菌素是指链霉菌（Streptomyces lactamdurans）发酵产生的头霉素C（Cephamycin C）经半合成制得的一类以头孢烯为母核，在β-内酰胺环上的C7位有一个反式甲氧基的头孢菌素。这类抗生素又称头霉素类抗生素（Cephamycins）。甲氧基的存在阻止内酰胺环与酶分子的接近，增强药物对β-内酰胺酶的稳定性，并提高对厌氧菌的活性，使本类抗生素具有较强的耐β-内酰胺酶性能，对一些产生β-内酰胺酶的细菌有较强的抗菌作用。
甲氧基头孢菌素对脆弱拟杆菌有特异的抗菌作用，但是对粪链球菌、难辨梭状芽孢杆菌，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌均无抗菌作用。甲氧基头孢菌素的抗菌性能与头孢菌素 阅读全部内容＞＞ |
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| 在多糖衍生物类色谱柱上手性拆分β_氨基醇及β_羟基硫醚类化合物 | 乐 | 2007-07-16 |
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| 1实验
1.1仪器与试剂
HPLC系统由Wate。的M510泵、M440紫外检测器( UV254 nm)及Rheodyne 7725进样阀组
成。Nelso M 1022积分仪和241 MC旋光仪(Perkin一Elmer)分别用于色谱数据的采集处理和反应产
物的旋光测定。色谱柱为配有相应预柱(50 x 4.6 mm)的250 mm x 4. 6 mmi . d的Chiralcel OD ,
Chiralcel OJ和Chiralpak AD ( Chiral Technologies )。洗脱剂为不同浓度配比的正己烷一异丙醇体
系，流速为0.70 mL/min。正己烷，异丙 阅读全部内容＞＞ |
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| 紫外-可见分光光度法在药物定量方面的应用 | 乐 | 2007-07-16 |
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| 紫外-可见分光光度法在药物定量方面的应用
在遵循朗伯-比尔定律的基础上，紫外分光光度法可以采用多种研究方法，如双波长、导数、显色及层析-紫外联用等方法，对中药饮片及中成药中的相关成分进行定量分析。
一、单波长法
此方法在药物分析方面应用较广。宣伟东等将海蟑螂全体经 37℃水温浸提取，硅胶薄层层析分离，用紫外分光光度法于 260nm 处测定腺苷吸光度。在 1.0～20.0μg/mL 的范围内腺苷的浓度和吸光度呈良好线性关系(r=0.9998，n=6)，平均回收率为 99.3％(RSD=1.9％，n=3)。方法简捷、准确，适用于海蟑螂中腺苷的含量测定。
刘志勤等以芦丁为对照，500nm 为测 阅读全部内容＞＞ |
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| 碧洁微生物限度检查法方法学验证 | 乐 | 2007-07-16 |
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| 一、试验内容
根据《中国药典》2005年版二部附录XI J微生物限度检查法，对碧洁（甲硝唑氯己定洗剂）的微生物限度检查法进行方法学验证。
二、试验材料
1.样品：碧洁（批号：20051101、20051102、20051103，提供单位：深圳南粤药业有限公司）
2.培养基：
3.验证用菌株：大肠埃希菌CMCC(B) 44102,金黄色葡萄球菌CMCC(B) 26003,枯草芽孢杆菌CMCCC（B）63501,铜绿假单胞菌CMCC(B) 10104，白色念珠菌CMCC(F) 98001,黑曲霉CMCC(F)98003,均购自深圳市药检所。
4.试验仪器：高压灭菌锅,恒温培养箱,台式干燥 阅读全部内容＞＞ |
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| 注册分类6化学药品种完成生物等效性试验后的资料整理 | 乐 | 2007-07-16 |
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| 化学药品注册分类6仍然占据了目前注册申请的较大比例，因此，提高注册申请效率，缩短申请周期，成为一个共同关注的问题。在审评中发现，目前许多申请人在完成生物等效性试验后，对于申请生产所需要提供的资料不是很明确，出现了一些本可以避免的问题。本文着重就此方面内容进行阐述。
化学药品注册分类6完成生物等效性试验，按照现行的《药品注册管理办法》（局令第17号） 附件二的要求，申报生产时需要的基本资料有以下几个方面：
（一）综述资料
1、药品名称。
2、证明性文件。
4、对主要研究结果的总结及评价。
5、药品说明书、起草说明及相关参考文献。
6、包装、标签 阅读全部内容＞＞ |
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| 键合纤维素(42甲基苯甲酸酯)手性固定相的制备及其手性拆分 | 乐 | 2007-07-16 |
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| 1 引 言
色谱对映异构体分离 ,特别是用高效液相色谱手性固定相法直接分离对映异构体被广泛地用于医
药、农药等领域 ,获得光学纯的、毒副作用小的单一对映体药物已成为现代药物研究的重要内容。在众
多的手性固定相中 ,纤维素、淀粉衍生物作为手性固定相被广泛地用于各种类型外消旋化合物的分析或
制备拆分中。到目前为止 ,这类手性固定相中有许多已有商品化手性柱出售[1,2]。作为商品化出售的
此类手性固定相的制备通常是将多糖衍生物涂敷到经氨丙基修饰的大孔硅胶上或将多糖衍生物制成聚
合物颗粒(或珠) 。但是在实际应用中 ,由于多糖衍生物在某些溶剂如四氢呋喃、氯仿中会溶胀或溶解 ,
造成柱 阅读全部内容＞＞ |
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| 多糖衍生物手性固定相的制备方法 | 匿名 | 2007-07-16 |
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| 摘 要 手性固定相色谱法已成为手**物拆分的一个重要方法 ,其关键和核心在于手性固定相
的研制 ,现已开发了众多手性固定相。其中 ,多糖衍生物手性固定相拆分能力强 ,可拆分大多数手**
物 ,广泛应用于手**物的分析与制备。本文对这类固定相的四种制备方法(涂敷法、键合法、整体成球
法以及交联2共聚法)进行了详尽的介绍 ,并比较了各种制备方法的优缺点。
关键词 多糖衍生物 手性固定相 制备
Preparation of Chiral Stationary Phases Based on Polysaccharide Derivatives
Wei Feng , Shen Bo 阅读全部内容＞＞ |
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| 薄层色谱在中国药典的应用 | 匿名 | 2007-07-16 |
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| 薄层色谱在中药分析的简单回顾
自20世纪60年代薄层色谱取代纸色谱（纸层析）技术作为一种快速、简单、灵敏的鉴别手段应用于中药材及中成药的鉴别，薄层扫描用于许多中药及中成药的含量测定，并收载于中国药典以来，在控制中药质量方面起到积极的作用，已为中药生产及质量监督管理部门所广泛认同。
80年代后期虽然各国药典逐渐倾向于应用液相色谱技术，但在草药分析领域，薄层色谱仍然广泛地被应用，尤其是欧洲国家。他们在器械、仪器、计算机化、自动化等方面都有快速的发展，而我们在技术上则一直滞留在初始阶段的状态，逐渐拉开了距离。薄层色谱在中药分析的简单回顾 阅读全部内容＞＞ |
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